
單細(xì)胞平臺(tái)

華大智造DNBelabC系列高通量單細(xì)胞5'RNA&V(D)J文庫(kù)制備試劑盒套裝與DNBelab C-TaiM 4 單細(xì)胞液滴生成儀結(jié)合使用,可以完成單細(xì)胞5RNA和TCR/BCR的文庫(kù)制備工作,配套DNBelabC系列分析包DNBC4Tools,可以實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的質(zhì)控和基礎(chǔ)分析。
作為華大智造單細(xì)胞系列建庫(kù)產(chǎn)品之一,該套裝基于對(duì)細(xì)胞標(biāo)簽微珠表面承載的引物設(shè)計(jì),在引物的尾部設(shè)計(jì)rGrGrG堿基,用來(lái)捕獲游離的引物polyA所捕獲的mRNA序列,并在mRNA逆轉(zhuǎn)錄完成后,在新和成的cDNA3端合成3個(gè)C堿基,與微珠表面設(shè)計(jì)的rGrGrG進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì),完成細(xì)胞內(nèi)mRNA序列的捕獲、分離、標(biāo)記的原理,完成mRNA的全長(zhǎng)序列信息獲取,對(duì)其中的擴(kuò)增放大后的5端序列進(jìn)行打斷、修復(fù)等文庫(kù)制備工作,完成mRNA的5段文庫(kù)制備;全長(zhǎng)cDNA經(jīng)過人和鼠的VDJ區(qū)間探針擴(kuò)增,可以制備出人和鼠的TCR/BCR文庫(kù),最終實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞水平的5’ RNA&V(D)J序列獲取和放大,進(jìn)行高通量測(cè)序后,使用DNBC4Tools分析工具包對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和初步質(zhì)控,深入分析的數(shù)據(jù)能夠揭示單個(gè)細(xì)胞5’RNA基因表達(dá)情況及單細(xì)胞水平的TCR/BCR多樣性數(shù)據(jù),在感染性疾病、腫瘤發(fā)生等免疫系統(tǒng)應(yīng)答過程中的機(jī)制研究,細(xì)胞治療,疫苗評(píng)價(jià)和開發(fā)及藥物評(píng)價(jià)和開發(fā)中廣泛使用。

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