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文章導(dǎo)覽:
Q1:MGIEsay 組織保存液可以適用于哪些應(yīng)用?
Q2:MGIEasy 組織保存液推薦保存的組織樣本大?。?
Q3:MGIEasy 組織保存液可以用于儲存單細胞嗎?
Q4:如果無法在72h內(nèi)完成組織解離等實驗,需要怎么做?
Q5:什么類型的單細胞測序應(yīng)用需要MGIEasy 組織保存液?
Q6: 如何用MGIEasy 組織保存液保存組織?
Q1:MGIEsay 組織保存液可以適用于哪些應(yīng)用?
主要推薦單細胞測序,尤其是關(guān)注細胞的基因表達、蛋白表達、抗原表位研究的單細胞 RNA 測序。
Q2:MGIEasy 組織保存液推薦保存的組織樣本大?。?/strong>
組織樣本建議切成不超過0.3cm x 0.3cm的小塊,根據(jù)不同組織可適當(dāng)調(diào)整,最大不超過0.5cm x 0.5cm的大小。
Q3:MGIEasy 組織保存液可以用于儲存單細胞嗎?
目前不建議儲存單細胞,從原理上組織保存液對細胞具有一定的保存能力,但目前缺乏充足的實驗數(shù)據(jù)證實對不同細胞的保存效果,建議使用專門的細胞保存液。
Q4:如果無法在72h內(nèi)完成組織解離等實驗,需要怎么做?
如果超過72h,推薦直接使用液氮速凍整個組織。不過這種處理方法,復(fù)蘇時容易造成細胞破損,可能已經(jīng)無法滿足單細胞 RNA 測序的需求,更適用單細胞核測序。請根據(jù)實際項目需求,來選擇應(yīng)用方案。
Q5:什么類型的單細胞測序應(yīng)用需要MGIEasy 組織保存液?
單細胞測序,尤其是需要研究基因表達、蛋白表達、抗原表位的單細胞 RNA 測序,需要實驗的時候保留完整的細胞形態(tài)和活性。新鮮的組織一旦離體,如果無法立即對組織進行單細胞后續(xù)實驗,組織的細胞狀態(tài)短時間內(nèi)就會發(fā)生變化甚至發(fā)生死亡,并在裂解后向周圍環(huán)境釋放,造成檢測中的背景噪音,從而影響單細胞數(shù)據(jù)質(zhì)量。
因此,新鮮組織離體的時候,如果不能馬上進行后續(xù)實驗,需要馬上使用 MGIEasy 組織保存液進行保存和運輸。
Q6: 如何用MGIEasy 組織保存液保存組織?
操作步驟如下:
1. 在生物安全柜中,準(zhǔn)備一個合適大小的一次性無菌培養(yǎng)皿,置于冰上,加入少量預(yù)冷至2 ℃~8 ℃的細胞培養(yǎng)基,如 DMEM。
2. 采集新鮮的組織樣本,并迅速置于冰上的培養(yǎng)皿中。
3. 用鑷子輕柔晃動組織,用培養(yǎng)基簡單地清洗組織。
4. 準(zhǔn)備一個新的一次性無菌培養(yǎng)皿并加入培養(yǎng)基,將培養(yǎng)皿置于冰上。用鑷子將清洗完的組織轉(zhuǎn)移至該培養(yǎng)皿。
5. 用手術(shù)刀片快速將組織切成不超過0.3cm x 0.3 cm的小塊,用培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基清洗切好的組織,去掉血液,肌肉組織等雜質(zhì),再轉(zhuǎn)移到組織保存液中進行保存。
提示:保存液與保存的組織的體積比應(yīng)大于10:1。建議10mL保存液保存不超過4~5塊0.3cm x 0.3cm的組織塊,約100mg。保存液過少可能會導(dǎo)致局部組織細胞缺乏保護。
6. 將保存液保存的組織放置于2 ℃~8 ℃保存或運輸,保存或運輸?shù)目倳r間不超過72小時。
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