近日,由深圳華大生命科學(xué)研究院主導(dǎo),多國(guó)科研團(tuán)隊(duì)合作在Nature上發(fā)表了文章Cell transcriptomic atlas of the non-human primate Macaca fascicularis,共同繪制了首個(gè)非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物(獼猴)全身器官細(xì)胞圖譜?;谌A大智造DNBelab C系列高通量單細(xì)胞RNA文庫(kù)制備試劑盒(DNBelab C4)和DNBSEQ測(cè)序平臺(tái),研究人員對(duì)獼猴的45個(gè)組織約114萬(wàn)個(gè)細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞測(cè)序分析,獲得了世界上首個(gè)非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物全身器官細(xì)胞圖譜。該圖譜將被用于物種進(jìn)化、人類(lèi)疾病以及藥物評(píng)價(jià)和篩選相關(guān)的研究,為生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展提供基礎(chǔ)性的資源和工具,為疾病診療、靶向藥物開(kāi)發(fā)提供助力,為人類(lèi)更好地探究生命的進(jìn)化提供可能。
華大智造特邀文章第一作者、韓磊博士對(duì)該文章進(jìn)行詳細(xì)解讀。
1、文章題目:Cell transcriptomic atlas of the non-human primateMacaca fascicularis
2、發(fā)表時(shí)間:2022年4月13日
3、發(fā)表期刊:Nature
4、主要研究團(tuán)隊(duì):本研究由深圳華大生命科學(xué)研究院聯(lián)合北京華大生命科學(xué)研究院、深圳國(guó)家基因庫(kù)、吉林大學(xué)、中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、瑞典卡羅林斯卡醫(yī)學(xué)院、英國(guó)劍橋大學(xué)、西班牙ICREA研究所、新加坡ASTAR等來(lái)自6個(gè)國(guó)家的35個(gè)科研團(tuán)隊(duì)共同參與完成。
5、DOI:https://doi.org/10.1038/s41586-022-04587-3
研究背景
21世紀(jì)初,人類(lèi)基因組草圖的問(wèn)世為生命科學(xué)研究譜寫(xiě)了一本生命“天書(shū)”,為生命的數(shù)字化提供了基礎(chǔ)。然而,遺傳信息是由細(xì)胞攜帶的,目前,人類(lèi)對(duì)自身細(xì)胞的認(rèn)識(shí)還很有限,全面解碼細(xì)胞的數(shù)字化特征將推動(dòng)生命科學(xué)的研究,為生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展提供基礎(chǔ)性的資源和工具。為此,我們將目光投向了和人的基因相似度高達(dá)93%的獼猴,繪制了一張獼猴的全身器官的細(xì)胞圖譜。
研究方法
基于華大智造的可方便攜帶、易上手操作、低建庫(kù)測(cè)序成本的DNBelab C4平臺(tái),研究團(tuán)隊(duì)對(duì)成年獼猴的45個(gè)組織進(jìn)行了單細(xì)胞核/單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組(sn/scRNA-seq)測(cè)序,同時(shí)輔以單細(xì)胞染色質(zhì)可及性(scATAC-seq)測(cè)序,原位雜交,免疫組化等實(shí)驗(yàn)方法。詳細(xì)分析了共有細(xì)胞組織特異性分子,成年潛在干細(xì)胞類(lèi)型,病毒易感細(xì)胞類(lèi)型數(shù)據(jù)庫(kù)和人類(lèi)表型和疾病變異的細(xì)胞定位圖譜。與此同時(shí),我們搭建了非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物百萬(wàn)單細(xì)胞交互式資源網(wǎng)站(https://db.cngb.org/nhpca/),為生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展提供一個(gè)基礎(chǔ)性的資源和工具,為疾病診療、靶向藥物開(kāi)發(fā)提供助力,為人類(lèi)更好地探究生命的進(jìn)化提供可能。
研究成果
01 繪制獼猴全身器官細(xì)胞圖譜
我們對(duì)成年獼猴的45個(gè)組織進(jìn)行了單細(xì)胞/單細(xì)胞核測(cè)序分析,共獲得約114萬(wàn)個(gè)高質(zhì)量的單細(xì)胞/單細(xì)胞核數(shù)據(jù)。經(jīng)過(guò)聚類(lèi)注釋?zhuān)蓪⑦@些細(xì)胞分成113種主要的細(xì)胞類(lèi)型和463種細(xì)胞亞類(lèi)(圖1)。通過(guò)這個(gè)圖譜,我們不僅可以找到組織特異型細(xì)胞標(biāo)記基因還可以找到各個(gè)組織共有細(xì)胞類(lèi)型(骨骼肌細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞,基質(zhì)細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞)的組織特異性標(biāo)記基因。也就是說(shuō),就算形態(tài)學(xué)上判斷為相同類(lèi)型的細(xì)胞,在不同組織中也會(huì)存在部分基因的表達(dá)量存在差異(圖2),這對(duì)于了解這些共有細(xì)胞在不同組織中功能的差異提供了分子層面的證據(jù)。
圖1 獼猴全身器官細(xì)胞圖譜
圖2 不同組織中的骨骼肌細(xì)胞存在基因表達(dá)差異
02 發(fā)現(xiàn)器官中的前體細(xì)胞,為器官損傷修復(fù)提供方向
我們還發(fā)現(xiàn)了多種存在于各個(gè)成年組織中的前體細(xì)胞,這些前體細(xì)胞表達(dá)一些干細(xì)胞(Stem cell)的基因(圖3a),可能可以為之后各類(lèi)器官損傷修復(fù)提供細(xì)胞來(lái)源,為哺乳動(dòng)物組織再生研究提供新的思路。
以腎臟為例,我們發(fā)現(xiàn)腎臟的腎小管細(xì)胞中均有不同比例的細(xì)胞表達(dá)干細(xì)胞特征基因LGR5(圖3d),其中,遠(yuǎn)端曲部腎小管(DCTC)的比例最高,超過(guò)30% 的DCTC細(xì)胞表達(dá)LGR5。
圖3 腎臟細(xì)胞表達(dá)干細(xì)胞特征基因LGR5
此外,通過(guò)對(duì)腎臟單細(xì)胞表觀組數(shù)據(jù)的分析,我們發(fā)現(xiàn)DCTC在LGR5基因位置區(qū)域具有較強(qiáng)的染色質(zhì)開(kāi)放性,從表觀組學(xué)上進(jìn)一步支持了LGR5在DCTC這種細(xì)胞上的特異性高表達(dá)。
03 為預(yù)防和治療
病毒性傳染病及遺傳疾病提供數(shù)據(jù)支持
基于該圖譜,我們構(gòu)建了包含新冠、乙肝、狂犬病毒等126種病毒易感細(xì)胞類(lèi)型的病毒數(shù)據(jù)庫(kù),這就像一本“病毒字典”,可以通過(guò)它快速查詢(xún)病毒最有可能侵染的細(xì)胞類(lèi)型,同時(shí)看到該細(xì)胞類(lèi)型可能分布的器官(圖4)。
圖4 病毒易感細(xì)胞類(lèi)型“字典”
以新冠為例,除了大家熟知的肺泡細(xì)胞外,我們發(fā)現(xiàn)新冠病毒受體ACE2還在胰腺、腎臟、膽囊、視網(wǎng)膜甚至睪丸的特定細(xì)胞類(lèi)型中表達(dá)(圖5),這預(yù)示著新冠病毒同樣有可能通過(guò)感染這些細(xì)胞,造成對(duì)應(yīng)組織/器官受損。醫(yī)生在檢查新冠肺炎確診患者肺部情況的時(shí)候,可能也會(huì)同步檢查腎臟、胰腺和膽囊等器官。因?yàn)檫@幾個(gè)器官同樣分布有新冠病毒可能感染的細(xì)胞。
圖5 新冠病毒受體ACE2在各個(gè)細(xì)胞類(lèi)型中的表達(dá)
此外,我們還構(gòu)建了人類(lèi)疾病關(guān)聯(lián)基因富集細(xì)胞圖譜,人們可輸入特定遺傳疾病的致病基因或遺傳位點(diǎn)來(lái)查詢(xún)?cè)摷膊】赡艿闹虏〖?xì)胞類(lèi)型(圖6)。數(shù)據(jù)顯示,在神經(jīng)疾病相關(guān)的遺傳位點(diǎn),往往在神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)類(lèi)型細(xì)胞上富集。免疫系統(tǒng)疾病相關(guān)的遺傳位點(diǎn),會(huì)較多富集在各類(lèi)免疫細(xì)胞上。表明構(gòu)建的獼猴單細(xì)胞圖譜可預(yù)測(cè)人類(lèi)遺傳性狀和疾病的關(guān)聯(lián)細(xì)胞,助力精準(zhǔn)預(yù)防或治療單基因甚至復(fù)雜遺傳疾病,特別是神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制提供數(shù)據(jù)支撐。
圖6 人類(lèi)疾病關(guān)聯(lián)遺傳位點(diǎn)富集細(xì)胞類(lèi)型圖譜
結(jié)論與展望
大規(guī)模細(xì)胞圖譜的繪制工作,對(duì)于我們理解器官結(jié)構(gòu)組成、胚胎發(fā)育和衰老、人類(lèi)疾病及生命演化等都具有重要的意義。未來(lái)我們還將開(kāi)發(fā)更高通量的單細(xì)胞技術(shù)以及具備空間分辨率的多組學(xué)技術(shù),為全面構(gòu)建生命單細(xì)胞分辨率的時(shí)空?qǐng)D譜提供重要工具。同時(shí)細(xì)胞圖譜數(shù)據(jù)正在迅速增長(zhǎng),其中蘊(yùn)含巨大的信息量。這些數(shù)據(jù)解讀和挖掘工作需要全球科學(xué)家的共同協(xié)作和努力。
本研究由深圳華大生命科學(xué)研究院聯(lián)合北京華大生命科學(xué)研究院、深圳國(guó)家基因庫(kù)、吉林大學(xué)、中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、瑞典卡羅林斯卡醫(yī)學(xué)院、英國(guó)劍橋大學(xué)、西班牙ICREA研究所、新加坡ASTAR等來(lái)自6個(gè)國(guó)家的35個(gè)科研團(tuán)隊(duì)共同參與完成。韓磊、魏小雨、劉傳宇、莊鎮(zhèn)堃、鄒軒軒、王智鋒和Giacomo Volpe為該論文的共同第一作者,劉龍奇、徐訊、侯勇和Miguel A. Esteban為論文的共同通訊作者。本研究已通過(guò)倫理審查,嚴(yán)格遵循相應(yīng)法規(guī)和倫理準(zhǔn)則。