文庫(kù)制備是測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程中非常關(guān)鍵的一環(huán)。在高通量測(cè)序技術(shù)飛速發(fā)展的今天,無(wú)論是臨床應(yīng)用還是科研領(lǐng)域都強(qiáng)烈呼喚自動(dòng)化平臺(tái)技術(shù)能夠?yàn)楦咄繙y(cè)序提供更多助益。10月10日,我們特別邀請(qǐng)到上海瑞金醫(yī)院轉(zhuǎn)化中心分子病理平臺(tái)的副主任技師朱勇梅老師,以及深圳華大生命科學(xué)研究院的生物信息副研究員梅俊譜老師,在華大智造舉辦的用戶(hù)分享會(huì)(建庫(kù)儀專(zhuān)場(chǎng))中,共同探討了自動(dòng)化建庫(kù)在分子病理檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室和前沿科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用及展望。
MGISP-100
讓分子病理檢測(cè)走向更廣闊的天地
“MGISP-100具有醫(yī)療器械注冊(cè)證,能夠滿(mǎn)足臨床應(yīng)用的資質(zhì)要求。我們引入MGISP-100后,只需要把樣本試劑放上機(jī)器、調(diào)試好參數(shù)后即可進(jìn)行自動(dòng)化建庫(kù)全流程。我們明顯體會(huì)到了一個(gè)非常輕松便捷的檢測(cè)流程。基于自動(dòng)化移液技術(shù)的樣本制備系統(tǒng),能夠自動(dòng)完成建庫(kù)全流程,并且結(jié)果穩(wěn)定均一,同時(shí)可以有效進(jìn)行污染防控?!?/span>
——上海瑞金醫(yī)院轉(zhuǎn)化中心分子病理平臺(tái),朱勇梅
上海瑞金醫(yī)院轉(zhuǎn)化中心分子病理平臺(tái)主要承擔(dān)血液惡性腫瘤相關(guān)的分子檢測(cè),檢測(cè)能力接軌國(guó)際。近年來(lái),高通量測(cè)序技術(shù)在血液惡性腫瘤中具有廣泛應(yīng)用,能夠有效篩選出高危白血病患者,使得高?;颊邫z出率提高至8%,患者可以盡早進(jìn)行干細(xì)胞移植術(shù)以改善預(yù)后。應(yīng)用高通量測(cè)序技術(shù)可以監(jiān)測(cè)腫瘤克隆演進(jìn)、開(kāi)展分子靶向藥物臨床試驗(yàn),提高分子檢測(cè)工作效率。
然而,高通量測(cè)序的臨床需求非常多,每年大概有30%至50%的樣本增長(zhǎng)量。并且高通量測(cè)序建庫(kù)步驟繁復(fù),檢測(cè)人員手工操作會(huì)花費(fèi)大量時(shí)間。同時(shí),手工建庫(kù)對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行單獨(dú)操作,更容易帶來(lái)樣本間的誤差問(wèn)題,以及存在交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)問(wèn)題。針對(duì)這些問(wèn)題,自動(dòng)化建庫(kù)儀的引入,為我們提供了一個(gè)行之有效的解題思路。
通過(guò)整合測(cè)序?qū)嶒?yàn)在樣本前處理過(guò)程中的酶反應(yīng)、磁珠純化、PCR反應(yīng)等建庫(kù)步驟,華大智造MGISP-100支持全流程的高度自動(dòng)化操作,中途無(wú)需人工介入,省時(shí)省力,能夠做到微量移液以及精準(zhǔn)的溫度控制:在選擇需要運(yùn)行的流程后,機(jī)器自動(dòng)工作3.5小時(shí)后,即可完成自動(dòng)化建庫(kù)。朱勇梅表示,“MGISP-100自動(dòng)化建庫(kù)和手工建庫(kù)的產(chǎn)量都是可比的,同時(shí)對(duì)于不同基因位點(diǎn)的突變檢測(cè)結(jié)果也是相當(dāng)穩(wěn)定的。”
此外,MGISP-100還可以根據(jù)應(yīng)用需要,按照實(shí)驗(yàn)條件調(diào)整設(shè)備腳本,例如根據(jù)插入片段、選擇連接后篩選條件,根據(jù)環(huán)境溫度、調(diào)整氣干時(shí)間,根據(jù)投入量、選擇對(duì)應(yīng)的PCR循環(huán)數(shù)等,不僅可以用于DNA文庫(kù)構(gòu)建,還可以用于RNA轉(zhuǎn)錄組文庫(kù)構(gòu)建,能夠靈活滿(mǎn)足臨床應(yīng)用的多元化需求。
MGISP-100/960
解放科學(xué)研究的“生產(chǎn)力”
“時(shí)空組學(xué)相關(guān)成果需要海量測(cè)序數(shù)據(jù)的支持。一個(gè)成人有2*1013個(gè)細(xì)胞,相應(yīng)會(huì)產(chǎn)生大量組織和樣本的處理需求,高通量測(cè)序以及自動(dòng)化的建庫(kù)處理對(duì)前沿科研具有十分重要的意義?!?/strong>
——深圳華大生命科學(xué)研究院,梅俊譜
其中,MGISP-100一次可完成8-16個(gè)樣本的文庫(kù)制備,適用于醫(yī)院等中小型臨床應(yīng)用研究實(shí)驗(yàn)室。MGISP-960一次可處理8-96個(gè)樣本,適用于高通量、交付型實(shí)驗(yàn)室,通過(guò)自動(dòng)化設(shè)備或流水線建設(shè)替代重復(fù)性高的操作,在大幅度解放實(shí)驗(yàn)室人力的同時(shí),提高了文庫(kù)制備穩(wěn)定性。
此外,在消除重復(fù)實(shí)驗(yàn)任務(wù)的同時(shí),華大智造MGISP系列自動(dòng)化樣本制備系統(tǒng)還能夠根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)的任務(wù)流程,進(jìn)行靈活性的改進(jìn):不僅能夠有效避免人為誤差的發(fā)生,極大地提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和可靠性,而且讓科研實(shí)驗(yàn)室的速度和質(zhì)量邁上更高的臺(tái)階,用自動(dòng)化及標(biāo)準(zhǔn)化的設(shè)備來(lái)增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的產(chǎn)出實(shí)力,提高科研效率和科研生產(chǎn)力。
總結(jié)相比手工建庫(kù),自動(dòng)化建庫(kù)效率更高、數(shù)據(jù)表現(xiàn)更穩(wěn)定,可生成高度均一的文庫(kù)。面對(duì)繁雜的樣本制備步驟,華大智造自動(dòng)化樣本制備系統(tǒng)MGISP-100/960提供了自動(dòng)化工具和平臺(tái),具有很高的準(zhǔn)確性和可靠性,能夠同時(shí)應(yīng)用于臨床和科研雙場(chǎng)景。與此同時(shí),作為開(kāi)放性平臺(tái),經(jīng)過(guò)一系列自動(dòng)化程序和腳本的調(diào)試以及多輪測(cè)試,華大智造MGISP系列還可進(jìn)一步適配不同類(lèi)型的第三方試劑和LDT自研試劑。