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訪談 | 陳唯軍:感染檢測,高通量測序未來可期

時間:2019-07-08作者:華大智造閱讀數(shù):5215分享

近日,華大集團傳染病首席科學家陳唯軍與大家暢談了感染領(lǐng)域的重大事件、研究現(xiàn)狀和感染與高通量測序技術(shù)結(jié)合帶來的發(fā)展前景等諸多廣受關(guān)注的問題。他從事感染領(lǐng)域研究和工作近20年,曾代表科學院和華大參與過SARS、內(nèi)地首例人感染高致病性禽流感H5N1、豬鏈球菌、新布尼亞病毒等重大疫情的防控,在他的日常工作中,還兼顧大量臨床疑難感染的診斷研究。讓我們一同聆聽感染檢測與高通量測序技術(shù)的二三事。


請您簡要回顧我國在這個領(lǐng)域取得的成績和面臨的問題有哪些?


傳染病是到今天為止還是人類的最大危害。一般來說,傳染病是個窮病,國家經(jīng)濟越不發(fā)達,傳染病的危害就越大,對于中國也是如此。


1950年代初,我國的人均預期壽命只有40.76歲,其中最重要的因素就是重大傳染病,其中包括天花、結(jié)核等,我們的文化旗幟魯迅先生就是死于結(jié)核病。新中國成立后,很多重大傳染病才得到有效的控制,毛主席1958年寫過送瘟神,去掉了血吸蟲病,1961年我們依靠接種疫苗,消滅了天花。


改革開放以后,國家建立了一整套重大傳染病的基礎(chǔ)研究、預防控制和應(yīng)急體系,非行為性重大傳染病的預防控制,目前中國是全球成效最好的榜樣之一,(傳染病的傳播因為人的行為參與,可以分為非行為性和行為性兩種),結(jié)核的控制已經(jīng)很有成效,乙肝有疫苗防控,相信再經(jīng)過一代人的努力,也會變成罕見病;我想中國很難再次出現(xiàn)SARS這樣的重大危害。但是艾滋病、梅毒等行為性的傳染病防控成為了當今社會最大的難點和問題,無論是戰(zhàn)略布局,還是產(chǎn)業(yè)層面布局都要重視起來,產(chǎn)業(yè)層面來講,還有大量需求要解決。



未來這個領(lǐng)域是否會成為繼NIPT、腫瘤之后,下一個高通量測序的重點領(lǐng)域?


是的。 一種病,是一個內(nèi)容;一種技術(shù),是一個工具?;卮鸩煌牟。枰煌墓ぞ?。雖然中國每年的感染不少于10億人次,但絕大多數(shù)常規(guī)的免疫、分子生物學手段都能解決,高通量測序主要解決的重癥疑難感染。


我國每年疑難、危重感染約2000萬人次,這還只是一人做一次檢測的量。目前臨床上主要是培養(yǎng)方法,但培養(yǎng)在臨床上只回答了不到20%的問題,還有80%多的問題沒有回答。即使是細菌培養(yǎng),今天在中國也只有40%左右普及率,如果高通量測序能回答80%的問題,那么每年將有更多的病人接受宏基因組高通量測序檢測。


隨著測序技術(shù)的進步,未來做一次感染檢測的費用可能從現(xiàn)在的四五千降低到可及的價格,感染有望成為最大的應(yīng)用領(lǐng)域。


您認為,在“染“領(lǐng)域,高通量測序比傳統(tǒng)方法的優(yōu)勢在哪里?


對于測序在未知感染中的應(yīng)用,我們叫做宏基因組學,測序是其中一部分。同樣,細菌培養(yǎng)方法的應(yīng)用,我們叫做宏培養(yǎng)組學方法。


宏培養(yǎng)組,很多醫(yī)院大概只有13%的陽性率,協(xié)和能做到18%,但也只能回答這么點醫(yī)學問題。宏基因組學到今天用的最好的是中樞系統(tǒng)感染,能回答的問題一下子到60%以上,基本相當于一線檢測了,因此只要是懷疑未知感染的,我們都會上宏基因組學。


腦炎在中國的感染,大概每年在30至40萬例,在腦炎領(lǐng)域,宏基因組方法比傳統(tǒng)方法有優(yōu)勢。但今天大部分重癥感染是血流感染,占到人群的70%-80%,主流的臨床宏基因組學產(chǎn)品,靈敏度也只有30%多,相比細菌培養(yǎng)方法靈敏度提高了1倍,但成本高了4倍,所以今天的使用量并不高。其實真要測血流,也能測出來,但要加100倍的成本??茖W上沒有問題,但經(jīng)濟上受不了。


呼吸道感染也面臨同樣問題,而如胸腹腔感染的重癥病例,它的背景復雜度比全血還要高5倍甚至10倍,要達到檢測重癥腦炎感染那樣的效果,那就需要一千倍以上的成本,所以的臨床宏基因組學檢測的靈敏度目前在20%以下,甚至可能還不如培養(yǎng)。


所以說,在腦炎類重癥感染中,高通量測序已經(jīng)體現(xiàn)出絕對優(yōu)勢了,在血流感染中只是稍微體現(xiàn)出優(yōu)勢來。而在胸腹水這一塊沒有什么優(yōu)勢。這還需要我們進一步發(fā)展技術(shù),提高性價比,更加可及。


發(fā)展?jié)摿Ψ矫?,目前細菌培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)基本缺乏改進的余地,而宏基因組學檢測技術(shù)的瓶頸主要在于成本和通量。如果使用MGISEQ-T7,假定通量提高100倍,成本沒有增加,那么我相信就可以解決血液感染、胸腹部感染的問題,就能回答60%—70%的病原學問題,市場也就能接受了。我堅信,高通量測序技術(shù)在這些方向上未來可期。



您使用了華大智造的哪幾款測序儀,使用體驗如何?


我們開展項目的時候剛開始用BGISEQ-100,這個機器雖然是OEM的,速度雖快,但成本居高不下,僅試劑成本就要1200元,到病人手上可能要到7000-8000元,產(chǎn)業(yè)化開展比較困難,所以大概只做了3-4千例。


后來我們自主化儀器BGISEQ-50出現(xiàn)了,顯著降低了成本,到達患者可以接受的程度,才帶來了傳染病宏基因組學技術(shù)的較大規(guī)模應(yīng)用,到今天為止已經(jīng)做了5萬多例了,這就是工具的進步推動了技術(shù)的商用。


隨著MGISEQ-2000平臺的出現(xiàn),我們開始轉(zhuǎn)產(chǎn)該平臺,原來用BGISEQ-50時要考慮成本,用20X的reads,到MGISEQ-2000平臺,我們基本都用40M的reads覆蓋。數(shù)據(jù)覆蓋度一提高,腦脊液樣本的臨床敏感性從就48%左右提高到了60%左右。還有一部分解決不了的樣本,用100M的reads就可以了,就能回答80%的問題了。


在血流感染方面,原來20Mreads覆蓋度大約只能回答30%左右的問題,而今天用MGISEQ-2000平臺,采用100Mreads覆蓋時,靈敏度提高了40%,而成本的增加是可控的,理論上MGISEQ-2000平臺將推動感染性疾病宏基因組學的更大范圍的臨床運用。


MGISEQ-2000真的是一款好的機器,穩(wěn)定性非常好,我們?nèi)ツ?月份轉(zhuǎn)產(chǎn)到該平臺,到現(xiàn)在1次都沒死過。不過雖然我們主流的生產(chǎn)機器是MGISEQ-2000,但是到醫(yī)院去還是要靠BGISEQ-50、MGISEQ-200這樣的小型機器。無論是機器價格,還是通量,MGISEQ-200都很適合。




您對華大智造的期望和寄語是什么?


工具領(lǐng)域,華大智造的占有率在快速上升,這是值得驕傲的事情,短短幾年變成了BIG TWO!因為有了BGISEQ-50,才有PMSEQTM的大規(guī)模商業(yè)化應(yīng)用了,這是很大的技術(shù)進步,這方面華大智造已經(jīng)做了很大的貢獻。


我相信,未來華大智造一定能成為行業(yè)標桿, MGISEQ-2000就是超越的原點,現(xiàn)在MGISEQ-T7出來了,我們認為,未來工具市場上,會讓大家多一個選擇。


我在外開會時,聽到了很多國外用戶的認可聲音,口碑是大家傳出來的,這代表了大家對我們的肯定,我們應(yīng)該抓住這個原點,加大投入,未來華大智造一定能在測序儀領(lǐng)域代表中國力量。

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